酵母双杂交文库筛选hTRIP15与Y盒结合蛋白1相互作用的

摘 要:为探讨甲状腺素受体相互作用蛋白(hTRIP15)是否与其他核蛋白发生相互作用,以hTRIP15作为“诱饵”,用酵母双杂交技术筛选人肝cDNA文库,在高严格度选择培养基(SD-Trp-Leu-Ade-His)上长出的克隆773个,再经β-gal表达和PCR等技术进一步缩小范围,经Blastn搜寻最终显示2个重复克隆编码一种共调节辅因子―Y盒结合蛋白-1(YB-1).将插入序列与全长YB-1比较发现进入ORF内320bp,插入序列编码82aa,该蛋白称为YB-1-p,经蛋白体外翻译及GST-pulldown试验证实YB-1-p与hTRIP15可通过与YB-1相互作用,参与调控MHCⅡ及TSH受体等甲状腺细胞重要基因表达.

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关 键 词 :Y盒结合蛋白-1(YB-1);hTRIP15;酵母双杂交文库筛选;GST pulldown 试验

中图分类号:Q758

文献标识码:A

文章编号:1007-7847(2005)01-0015-04
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